什么是目的(什么是目的基因)
什么是目的基因
质粒是基因工程的重要工具,其携带的目的基因是人们需要导入受体细胞的目标基因。
什么是目的基因高中
目的基因一般是受体细胞不具有的,受体细胞基因缺陷的例外,运载体一般是环状DNA,具有标记基因,至少有两对启动子,切割点也不能少,受体细胞没有什么限制,动物细胞用显微注射技术,植物细胞采用农杆菌转化法,基因枪法,还有我国发明的花粉管通道法,微生物采用钙离子处理法。知识有限,见谅
什么是目的基因和质粒的自身环化
载体和运载体的区别:
运载体是基因工程中运载母的基因的专称,而载体是一个统称,可包括运载体,运载体是一种载体,一些蛋白也是载体(如主动运输中的载体蛋白等),载体的范围较大。
什么是目的基因反向连接
目的基因反向链接的意思是基因序列颠倒反向。
第一,目的基因原本正确顺序为ATGCGT,目的基因反向链接TGCGTA了,完全反向颠倒链接了。
第二,反向链接,造成序列完全改变,后果是基因无法表达,翻译不出来来蛋白质,或者不是原来想要的蛋白质等后果。
第三,通常采用双酶切手段来产生不同的黏性末端,可以避免造成基因反向链接。
什么是目的基因?获取目的基因的途径有哪些?
1.从基因文库中获取目的基因(俗称:鸟枪法):将含有某种生物的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库。当需要某一片段时,根据目的基因的有关信息,如根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。
2.化学合成法。已知目的基因的核苷酸序列,可用DNA合成仪直接合成。
3.用PCR技术扩增技术提取。已知目的基因引物的序列,将整个DNA放入合成仪,因为只有当引物与模板结合后DNA热聚合酶才能行使聚合功能,所以只有引物中间的目的基因被大量扩增,即被提取出来。 参考资料: 人教版生物选修三
什么是目的基因自身环化
在目的基因的两侧接上限制性核酸内切酶酶切位点的方法是:利用基因重组技术,讲限制性核酸内切酶识别序列连接在目的基因两侧。
一,原理:在目的基因的两侧接上限制性核酸内切酶酶切位点的原理是基因重组。此时,目的基因就相当于一段已知的脱氧核糖核苷酸序列。用dna连接酶讲限制性核酸内切酶的识别序列连接在其两端即可。
二,操作步骤:首先要找到想要的限制性核酸内切酶的识别序列,然后用pcr合成仪对这段序列进行扩增。最后再用dna连接酶连接在目的基因上即可。
什么是目的基因什么是标记基因
以下DNA都用D代替,RNA都用R代替,关键词冠以★
这四个“子”都是存在于DNA分子上的序列,它们的命名,表现了四者在DNA被转录为RNA这一过程中的身份,作为“标记”,标记了DNA将如何被转录成R.
注意,既然有标记,就要有"★RNA聚合酶"来识别这些标记,使指定DNA片段转录成符合需要的RNA.
当生命体需要合成某种蛋白质时,发出指定信号,传达到能识别这种信号的细胞.细胞接到合成任务,将告知RNA合成酶需要转录哪些DNA片段[即基因],R合成酶根据要求,结合到指定的标记上,这个标记叫做——启动子.
★启动子:DNA分子上的转录起始信号序列,是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段序列.
到此,楼主应该可以联想到终止子的意义了,看名字也想到了
★终止子:DNA分子上(基因末端)的转录停止信号序列,具有使RNA聚合酶停止合成R和释放RNA链的作用.
有些终止子的作用可被特异的因子所阻止,使得RNA聚合酶得以越过终止子,继续转录,这称为★通读.
以上是对启动子和终止子的描述.下面是对★外显子和★内含子的描述.
RNA聚合酶结合到启动子上,转录过程开始,R链一直延长到终止子结束.脱离D分子,称为一个叫做原R的分子,原R分子需要被加工[如,去除内含子,保留外显子],才能成为需要的R分子.
这个加工过程在 真核生物 和 原核生物之间有所差别.
原核生物的基因,一般都是★连续的基因,所有的R片段,都将被翻译为蛋白质,即被显式的表达出来,所以就叫外显子.原核生物的D几乎都是外显子.
真核生物的基因,又叫★断裂的基因,因为内含子离散的分布在外显子周围.从原R加工成目的R过程中,内含子将与外显子断开,并除去,因此内含子将不能被翻译为蛋白质,而得到表达.
至此,★外显子 就是内被翻译为蛋白质而得以表达的基因片段.而★内含子,则反之.
什么是目的基因和质粒的反向连接
反义核酸技术是目前人工干预基因表达的一项重要技术,它利用人工合成或重组的与靶基因互补的一段反义DNA或RNA片段,特异性地与靶基因结合,达到封闭其表达的目的。
此技术已成为基因治疗的重要手段,其中构建反义表达载体就可以在靶细胞内直接产生致病基因的反义RNA片段。
将获得的致病基因反向插入表达载体,即可构建成反义表达载体。当反义表达载体导入靶细胞后,就可转录出与致病基因mRNA互补的反义RNA,特异性地封闭致病基因的表达。
什么是目的基因的表达
基因也叫遗传因子,它存储着人类的种族、血型、孕育、生长、凋亡等过程的全部信息,基因的功能具体如下:
1、具有支持生命的基本构成和性能:人体的生老病死、成长衰亡等一切生命现象都与基因有关,它也是决定生命健康的内在因素。
2、生物学功能:如作为蛋白质激酶对特异蛋白质进行磷酸化修饰。
3、细胞学功能:如参与细胞间和细胞内信号传递途径。
4、发育功能:如参与形态建成等。
什么是目的基因?可从哪些途径获取?
PCR技术是DNA扩增技术,它能在比较短的时间内产生大量的DNA。在获取目的基因后才使用PCR技术。
获得目的基因的方法:
一、构建基因文库
提取总DNA。
用限制性内切酶将总DNA切成小片段,连到质粒或噬菌体载体上,把这些质粒转化到细菌,随着细菌繁殖而复制,这个过程又称为基因克隆(gene clone)
将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上,便构成了该生物的基因文库(gene library)。
二、反转录人工合成互补DNA
细胞核中转录的mRNA,已经加工去除内含子,只有外显子(编码蛋白质的序列),比构建基因文库优越,因此,先从细胞中提取所需的mRNA。
以mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成互补的DNA片段(complementary DNA, cDNA),在逆转录完成时, mRNA被降解。在大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段的作用下,再以第一条DNA为模板,合成另一条互补DNA链。
优点 在细胞分化各阶段细胞往往转录出特异的编码特殊蛋白质的mRNA。因此,用cDNA方法获取的DNA片段往往是具有特定功能的目的基因。
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