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rt-pcr与pcr区别(pcr与rt-pcr有何不同)

2023-03-30 15:00:06自我学习2

pcr与rt-pcr有何不同

RT-PCR是real-time PCR的话,和qPCR是一样的,都是荧光定量PCR。相比普通PCR,会加入染料,便于收集荧光信号。结果可以得出相对/绝对 浓度等多组数据,然后根据你的目的,对实际数据进行分析。还能通过ntc的ct值判断实验合不合格。

rt-pcr和qpcr的不同

普通RT-PCR是半定量的。。即需要从条带的亮度判断量的相对多少。。

荧光定量PCR是定量的。。

因为两者反应体系,要求有很大区别,引物通常不能通用。除了上面提到的荧光定量PCR产物要控制在60-200nt之间,退火温度也比较高。。一般要达到60度

rt pcr和一般pcr的区别有哪些

虽然Real-time PCR(实时荧光定量PCR)和Reverse transcription PCR(反转录PCR)看

起来都可以缩写为RT-PCR,但是,国际上的约定俗成的是:RT-PCR

特指反转录PCR,而Real-time PCR一般缩写为qPCR(quantitative real-time PCR)。 更正楼主的观点:qPCR不一定与反转录相关,除了可以用cDNA作为模板,也可以用基因组DNA等作为模板。而反转录PCR也不一定非要与荧光定量相关,从mRNA中反转录得到cDNA,然后PCR扩增出目的基因,这也是反转录PCR。 综上,那RT-qPCR(也有人写成qRT-PCR)就很好理解了,就是结合了荧光定量技术的反转录PCR:先从RNA反转录得到cDNA(RT),然后用Real-time PCR进行定量分析(qPCR)。

rt-pcr和rt-qpcr

基本原理:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。

在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。

二、PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:

1、模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。

2、模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。

3、引物的延伸:DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。

pcr和rtpcr的区别

RT-PCR是对RNA进行反转录成cDNA后再进行PCR,PCR是针对DNA直接扩增的不知道你是不是问这个问题.还有一种Real-time PCR 也会有部分人缩写为RT-PCR,这个就是实时荧光定量PCR,较普通PCR特异性强敏感度高,检测范围更广泛,同时可以对扩增模板进行相对定量或绝对定量计算.

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